Клетки СД4 при ВИЧ: что это и почему они важны для организма? Анализы на вич, вирусная нагрузка и показатели Поднятие сд клеток с 50.

Что такое лимфоциты CD4 и почему так важно их количество, знает каждый ВИЧ-положительный пациент. Для большинства из нас это понятие неизвестное. В статье расскажем о белых форменных элементах крови, лимфоцитах CD4 и CD8, их значении и нормальных показателях.

Главные наши защитники

Лимфоциты - это одни из разновидностей белых кровяных клеток и самые главные наши иммунные клетки, которые защищают организм от вирусных, бактериальных, грибковых инфекций, продуцируют антитела, сражаются с раковыми клетками и координируют работу других агентов иммунного ответа.

Лимфоциты бывают 3 видов:

• В-лимфоциты - «шпионы» иммунной системы. Они, один раз встретившись с возбудителем, запоминают его. Именно благодаря им у нас вырабатывается иммунитет к тем болезням, которыми мы переболели. Их порядка 10-15 %.
• NK-лимфоциты - «КГБ» нашего организма. Они отслеживают «предателей» - зараженные клетки организма или раковые. Их порядка 5-10 %.
• Т-лимфоциты - «солдаты» нашего иммунитета. Их много - порядка 80 %, они обнаруживают и уничтожают патогены, которые попадают в наш организм.

Общая характеристика

Все лимфоциты имеют размеры от 15 до 20 мкм в диаметре. Объем цитоплазмы большой, а ядро неправильной формы со светлым хроматином. Т-лимфоциты и В-лимфоциты возможно различить только при использовании иммуноморфологических методов.

Все они способны к фагоцитозу и могут проникать сквозь кровеносные сосуды в межклеточную и межтканевую жидкости.

На поверхности мембран Т-лимфоцитов расположены белковые рецепторы, которые связаны с молекулами главного комплекса гистосовместимости человека. Именно эти корецепторы определяют функции и задачи, которые решают различные виды лейкоцитов.

Средняя продолжительность их жизни 3-5 дней, погибают они либо в месте воспалительного процесса, либо в печени и селезенке. А образуются все в костном мозге из гемопоэтических предшественников.

Т-лимфоциты: направления защиты

Эта многочисленная армия работает на благо нас в нескольких направлениях:

• Т-киллеры непосредственно уничтожают вирусы, бактерии, грибки, которые попали в организм. На их мембране находятся специальные белки-корецепторы CD8.
• Т-хелперы усиливают защитный ответ организма и передают информацию о чужеродном агенте В-лимфоцитам, чтобы они вырабатывали необходимые антитела. На поверхности их мембран находится гликопротеин CD4.
• Т-супрессоры регулируют силу иммунного ответа организма.

Нас интересует работа и значение Т-лимфоцитов хелперов CD4. Именно о специфике этих помощников мы будем подробно рассказывать.

Еще немного про лимфоциты

Все лимфоциты образуются в костном мозге из специфичных гемопоэтических стволовых клеток (hematopoietic stem cell, от греческих слов haima - кровь, poiesis - создание). В-лимфоциты проходят созревание в костном мозге, а вот Т-лимфоциты в вилочковой железе или тимусе, отчего и получили свое название.

Аббревиатура CD обозначает cluster of differentiation - кластеры дифференциации. Это специфические белки на поверхности мембран клеток, которых существует несколько десятков видов. Но чаще всего исследуются CD4 и CD8, так как именно они имеют значительное диагностическое значение.

ВИЧ и CD4-лимфоциты

Именно Т-хелперы являются мишенью для атаки вируса иммунодефицита человека. В эти клетки иммунной системы вирус внедряется и встраивает свою ДНК в ДНК лимфоцита. Лимфоцит cd4 погибает и дает сигнал к увеличению выработки новых Т-хелперов. Именно это и нужно вирусу - он тут же проникает в молодые лимфоциты. В результате имеем замкнутый круг, с которым наш иммунитет справиться не может, как и вся современная медицина.

Норма и задачи

Имея данные о количестве CD4 T-лимфоцитов в крови пациента, можно делать вывод о здоровье иммунной системы. Если их мало - иммунная система не в порядке.

Нормальное количество лимфоцитов CD4 в кубическом миллиметре крови - от 500 до 1500 единиц. Подсчет их особенно важен для ВИЧ-позитивных людей. Именно по количеству лимфоцитов CD4 в крови пациента врач принимает решение о начале антиретровирусной терапии.

У пациентов с ВИЧ при отсутствии лечения количество хелперов в крови уменьшается на 50-100 клеток в год. При количестве лимфоцитов CD4 в крови меньше 200 единиц у пациентов начинается развитие СПИД-ассоциированных болезней (например, пневмоцистной пневмонии).

Доля хелперов в анализе крови

Для обычного человека большее значение имеет не количество этих клеток, а их доля в крови, и именно такая графа чаще встречается в результатах анализа крови. У здорового человека доля лимфоцитов CD4 в крови составляет 32-68 % от общего количества всех лейкоцитов.

Именно показатель доли Т-хелперов зачастую более точен, чем непосредственный их подсчет. Например, количество хелперов в крови может меняться на протяжении нескольких месяцев от 200 до 400, но при этом их доля составляет 21 %. И пока этот показатель не меняется, можно считать, что иммунная система в норме.

Если же доля CD4 Т-лимфоцитов снижается до 13 % вне зависимости от их количества, это значит, что появились существенные повреждения в работе иммунной системы человека.

Иммунный статус

В результатах анализа может быть указано и соотношение Т-хелперов к Т-киллерам - CD4+/CD8+ (количество лимфоцитов CD4 поделенное на количество лимфоцитов cd8). Для ВИЧ-положительных людей характерно низкое количество CD4 и высокое количество CD8, а соответственно, и показатель их соотношения будет низким. При этом если в процессе лечения этот показатель растет, то это свидетельствует о том, что медикаментозная терапия работает.

Нормальным считается соотношение лимфоцитов CD4 к CD8 от 0,9 до 1,9 в общем анализе крови человека.

Клинико-диагностическое значение

Определение количества и содержания основных групп и субпопуляций лимфоцитов в крови пациента имеет значение при иммунодефицитных состояниях, лимфопролиферативных патологиях и ВИЧ-инфекции.

Количество лимфоцитов CD4 может увеличиваться при других иммунных активациях, например, инфекциях или отторжении трансплантата.

Данные о количестве и соотношений этих субпопуляций лимфоцитов используются для подтверждений или опровержений диагноза, для мониторинга работы иммунной системы, для прогноза тяжести и длительности течения болезни и оценки эффективности терапии.

Когда анализ необходим?

Главными показаниями к проведению анализа крови на количество лимфоцитов CD4 являются следующие:

• Инфекционные заболевания, имеющие хроническое и затяжное течение, частые рецидивы.
• Подозрение на врожденный или приобретенный иммунодефицит.
• Аутоиммунные заболевания.
• Онкологические патологии.
• Аллергические заболевания.
• Обследования до и после трансплантаций.
• Обследование пациентов перед серьезными полостными хирургическими операциями.
• Осложнения в послеоперационный период.
• Мониторинг антиретровирусной терапии, эффективности цитостатиков, иммунодепрессантов и иммуномодуляторов.

Подготовка и проведение анализа

Биоматериал для клинико-диагностического анализа - венозная кровь пациента. Перед сдачей крови на определение CD4+/CD8+ необходимо исключить курение и физические нагрузки. Кровь сдают натощак, последний прием пищи - не менее чем за 8 часов до анализа.

Детям до пяти лет и пациентам, которым противопоказано голодание, допускается прием легкой пищи за два часа до анализа.

Интерпретация результата

Соотношение CD4+/CD8+ выше нормы при таких заболеваниях, как лимфолейкоз, тимома, болезнь Вегенера и синдром Сезари. Повышение количества клеток может говорить о значительной вирусной нагрузке и аутоиммунных реакциях.

Этот показатель увеличивается при мононуклеозе, который вызван вирусом Эпштейна-Барра, хронических лимфолейкозах, миастениях, рассеянном склерозе, ВИЧ-инфекции.

Показатели соотношения в районе трех часто отмечается в период острой фазы различных инфекционных заболеваний. В середине воспалительного процесса чаще наблюдается снижение количества Т-хелперов и рост количества Т-супрессоров.

Понижение данного показателя за счет увеличения количества супрессоров характерно для некоторых опухолей (саркома Капоши) и системной красной волчанки (врожденный дефект иммунной системы).

Продолжу про лечение ВИЧ-инфекции. Напомню три основные цели лечения:

1. Прежде всего снизить количество вируса в крови ниже уровня определения (об этом был предыдущий ).
2. Увеличить (или хотя бы не растерять) количество CD4-клеток.
3. Сделать так, чтоб при всем при этом человек чувствовал себя хорошо (или хотя бы сносно). Потому что если человек чувствует себя плохо, лечение он рано или поздно закончит. На этот пункт обращу внимание, потому что могло показаться, что все, лекарства есть, успех есть, чего переживать. На самом деле лекарства в долгосрочной перспективе могут портить здоровье (например, медленно убивать почки) и каждый день доставлять существенные неудобства.

Если с вирусной нагрузкой все более-менее понятно (вирус не должен определяться в крови на постоянной основе, что должно быть достигнуто максимум через 6 месяцев), то четких критериев, как оценить успех лечения с точки зрения CD4-клеток, нет. Наиболее обтекаемая формулировка звучит так -- лечение успешно, если CD4-клетки подросли. Но насколько они должны подрасти, никто точно сказать не может. На 50? на 100? Стать больше 200 (чтобы защитить от СПИД-маркерных заболеваний) или больше 500 (чтобы приблизиться к иммунному статусу ВИЧ-негативных)?
Проще оценить неудачу -- если клетки на фоне лечения начали падать, надо что-то с этим делать. В общем-то понятно, почему нет четких оценок. Трудно предсказать, как будет восстанавливаться иммунная система конкретного человека. И главное, повлиять на этот процесс извне практически невозможно. Есть, конечно, успешные попытки и схемы, наука работает в этом направлении, но чтоб на уровне каждой клиники и каждого инфекциониста -- нет, такого пока нет.

Так же, как и вирусная нагрузка, количество CD4-клеток изменяется в 2 фазы: сначала быстро, потом медленно. Одно из исследований показывает, что в среднем CD4-клетки подрастали на 21 клеточку за каждый месяц в течение первых трех месяцев, а потом на 5 за каждый последующий. Другие данные говорят, что за первый год лечения количество клеток подрастало на 100.

Медики до сих пор спорят, есть ли предел восстановления у иммунной системы? Если количество клеток растет, будет ли так всегда, или когда-то они достигнут своего максимума? Тонкий вопрос, потому что важный с точки зрения "надо ли менять препарат или это уже все, предел, можно успокоиться". Пока считается, что оба варианта возможны:
1. Медленное, но постоянное увеличение количества CD4-клеток.
2. Достижение определенного уровня (трудно точно предсказать, какого именно) и после этого остановка роста.

На чем можно основывать свой прогноз?

1. К сожалению, статистика говорит о том, что с чем более низкого уровня CD4-клеток начинается лечение, тем меньше шансов, что они подрастут до 500. Зато хорошая новость в том, что для CD4-клеток любое снижение вирусной нагрузки -- уже плюс. Чем меньше вируса в крови, тем больше у них шансов оставаться в живых. А чем больше клеток, тем меньше у человека риск на развитие инфекции или опухоли. Поэтому даже если лекарствами не удается окончательно "прижать" вирус, лечение стоит продолжать, чтобы сохранить свою иммунологическую армию.

2. Возраст пациента играет роль. Как правило, чем моложе человек, тем быстрее и лучше восстанавливается его иммунная система. Хотя мне рассказали про одного дедушку, который знать не знал о ВИЧ-положительности, пока не попал в больницу со СПИД-маркерным заболеванием. Прогноз был не очень хороший: возраст за 60, CD4 меньше 150. Начали лечение, дедушка отреагировал очень хорошо. CD4 выросли до 500. Дедушке сейчас уже за 70, все у него ок. Этот пример хорошо показывает, какими разными бывают наши организмы и как отдельный человек может быть вопреки всем данным статистики.

3. Наличие других заболеваний. Цирроз печени играет негативную роль, иммунологические болезни тоже сказываются негативно. Скрытые инфекции типа туберкулеза могут обостряться (или вообще в первые дать о себе знать) на фоне ожившей иммунной системы, что тоже доставляет хлопот. Вроде бы по анализам все идет хорошо, а человеку становится хуже. Вот уже и кашлять начал.

4. Лечился человек до этого или нет. Считается, что лучший иммунный ответ у тех, кто никогда не лечился. У тех, кто прерывал лечение, CD4-клетки падают и не вырастают до предыдущего максимального уровня. Т.е прерывая лечение, человек оставляет себе все меньше шансов на нормальную иммунную систему.

Бывают ситуации, когда одна из целей терапии достигается, а другая -- нет. Например, уровень вируса снижается ниже уровня определения, а клетки сильно не подрастают. Или наоборот, клетки хорошо растут, а вирус все никак не сдастся. Чаще бывает первая ситуация: благодаря таблеткам вирус не определяется, но CD4 сильно не увеличиваются. Даже не смотря на новые препараты, такая ситуация возникает почти у четверти пациентов. Пока медикам не до конца ясно, что с этим делать.
Одно из очевидных решений -- пересмотреть схему лечения, но нет четкого понимания, когда это делать, как и нужно ли вообще (привыкание к новым препаратам, новые побочные эффекты -- это все повышает риск прекращения лечения со стороны пациента). К тому же, исследования показывают, что нет доказанной эффективности этого метода. В целом стараются учитывать токсичность некоторых лекарств, чтобы своим лечением не убить CD4-клетки до конца. А если CD4-клетки длительно остаются ниже 250-350, то добавляют к лечению антимикробные препараты в виде профилактики СПИД-маркерных заболеваний.

Один из главных вопросов в лечении ВИЧ-инфекции -- когда, собственно, надо начинать лечение? На первый взгляд все очень просто. Чем ниже CD4, тем скорее придет смерть, значит тем быстрее надо начинать лечение. В реальности все сложнее. Надо учитывать и токсичность препаратов. Скажем так, год жизни с приступами поноса -- можно себе представить. А 20 лет? При том, что понос -- это не самая большая проблема, возникающая от лечения. Угроза пересадки почки или жизни на диализе -- куда серьезнее.
Не стоит забывать и про денежные ресурсы страны. Лечить 200 человек или лечить 1000 человек в год -- разница есть. Поэтому в странах победнее лечение начинали с 200 CD4-клеток, в странах побогаче (Америка, например) -- с 500. Большинство стран все же склоняется к тому, что 350 CD4-клеток -- это уже твердое показание для начала лечения. У нас ориентируются на 400. Напомню, что почти половина наших пациентов начинают лечиться с 250 клеток, хотя могли бы с 400, если бы пришли раньше. Исходя из всего написанного выше -- очень жаль, что они теряют эти 150 клеточек в условиях, когда государство согласно лечить их бесплатно (да, в Эстонии так. Встаешь на учет к инфекционисту, раз в месяц приходишь за лекарствами, получаешь их под роспись в специальном кабинете из рук медсестры. 5 дней в неделю, с 8 до 4. Такие кабинеты находятся при больницах-поликлиниках).

Самый последний, но едва ли не самый важный момент: настроен ли человек лечиться? Получается, что без четкого, осознанного желания лечиться может быть и не смысла торопиться (в ситуации, когда клеток, например, от 200 до 350). Потому что опасно начинать и потом прерывать лечение (вирус не дурак, мутирует и найдет защиту от препаратов, своими перерывами человек дает ему на это шанс). Потому что побочные эффекты, которые переносить будет не доктор, а человек сам, каждый день. Например, большинство препаратов не совместимы с алкоголем. Понимаете да, какая это проблема. Препараты надо пить 2 раза в день, так что трудно найти момент, чтоб выпить, протрезветь, а потом таблеточку. Один мужчина нам говорит: "Так я же когда пью, я таблетки не принимаю, плохо же мне будет. Как часто я пью? ну 2 раза в месяц. А по сколько дней? ну дней по 10".
Некоторые таблетки надо пить только на ночь, что не подходит для тех, кто работает ночью или по сменам. Первые месяц-два будут особо неприятными, организм будет привыкать, иммунная система будет окрыляться, скрытые инфекции пробуждаться -- это все не для напряженных периодов жизни, не для отпусков или праздников.
Это не считая факторов чисто медицинских -- есть ли анемия у человека, есть ли С-гепатит, как работают почки и т.д.

В общем, начало лечения, выбор препаратов, само лечение -- дело сугубо индивидуальное. В каждом конкретном случае рассматриваются не анализы, а человек и его конкретная жизнь (у пациентов инфекциониста более чем особенные жизни). Поэтому чем больше времени есть для принятия решения, для разговоров с доктором, тем лучше. А это все зависит от иммунного статуса человека и его знания, есть у него ВИЧ или нет. Так что, как обычно, закончу на том, что надо тестироваться и тестировать, тогда и время будет на раздумия.

Это поезд, который везёт человека от начальной станции - момента инфицирования до конечной станции - стадии СПИДа. Иммунный статус - это оставшееся расстояние до конечной станции. Вирусная нагрузка - скорость поезда. Терапия - стоп кран, который останавливает поезд и включает обратный ход. Но если дёрнуть за стоп-кран слишком поздно и на большой скорости, то инерция поезда уже не позволит эффективно его затормозить и включить задний ход.

Иммунный статус - это:

1. Общее состояние иммунной системы (напр., "низкий И.С.", "высокий И.С.")
2. Специальный анализ крови для оценки состояния иммунной системы (напр., "сдать кровь на И.С.").

Иммунодефицит - это сниженный иммунный статус.

Для чего определяют иммунный статус?

CD4-клетка

Анализ на иммунный статус определяет количество различных клеток иммунной системы. Для людей с ВИЧ имеет значение количество клеток CD 4 (или Т 4 -лимфоцитов).

CD 4 или Т 4 -лимфоциты - белые клетки крови, которые отвечают за "опознание" различных болезнетворных бактерий, вирусов и грибков, уничтожать которые должна иммунная система.

Информация о количестве CD 4 клеток позволяет врачу оценить уровень здоровья иммунной системы, ухудшается оно или улучшается. Слово "статус" - означает состояние.

Соответственно, чем их количество больше, тем лучше .

Как измеряется иммунный статус?

Еще одна CD4-клетка

Иммунный статус измеряется с помощью специального анализатора и выражается абсолютным числом клеток CD 4 в одном микролитре крови (то есть не во всем организме). Обычно его записывают как "клеток/мкл" или "мкл -1 ".

Кроме того, врач может оценить процент, который CD 4 составляют от общего количества белых клеток. Это процентное (относительное) количество клеток CD 4 . Его нормальное значение - 30-60%.

Почему иммунный статус может изменяться с течением времени?

ВИЧ может инфицировать CD 4 и производить в них свои копии, в результате чего эти клетки погибают. Хотя клетки гибнут из-за ВИЧ каждый день, миллионы CD 4 воспроизводятся им на замену. Тем не менее, с течением длительного времени (годы) количество CD 4 может уменьшаться и даже снижаться до опасного уровня. У большинства людей с ВИЧ количество CD 4 обычно снижается через какое-то количество лет.

Что значит то или иное количество CD 4 клеток?

• от 500 до 1200 клеток/мкл - норма.
• от 350 до 500 клеток/мкл говорит о сниженной работе иммунной системы (умеренном иммунодефиците).
• от 200 до 350 клеток/мкл или начинает быстро снижаться (выраженный иммунодефицит) - это повод поговорить со своим врачом о назначении антиретровирусной терапии .
• менее 200 клеток/мкл (глубокий иммунодефицит) - рекомендуется начало терапии, так как при таком иммунном статусе возникает риск СПИД-ассоциированных заболеваний.

От чего зависит количество СD4-клеток?

Количество клеток CD 4 может то подниматься, то снова падать в результате инфекций, стресса, курения, физических упражнений, менструального цикла, приема контрацептивных таблеток, времени суток и даже времени года.

Количество CD4 (полное название: количество CD4+ Т-лимфоцитов, или количество CD4+ Т-клеток, или Т4, или иммунный статус) – это результат анализа крови, который показывает, сколько таких клеток содержится в кубическом миллиметре крови.

Количество CD4 является очень хорошим «суррогатным маркером». Он указывает: насколько сильно ВИЧ поразил иммунную систему, какова глубина инфекционного процесса, каков риск других инфекций, когда необходимо начинать лечение. Среднее количество CD4 клеток для ВИЧ-отрицательного человека колеблется от 600 до 1900 кл./мл крови , хотя у некоторых людей этот уровень может быть выше или ниже.

Через 2-3 недели после инфицирования количество CD4 обычно падает.

По мере того, как иммунная система начинает сопротивляться, количество CD4 снова повышается, хотя и не до исходного уровня.

В дальнейшем, с годами, количество CD4 постепенно снижается. Средний ежегодный уровень падения количества CD4 составляет около 50 клеток/мм3. У каждого отдельного человека эта скорость индивидуальна, зависит от многих факторов, таких, как субтип вируса, возраст человека, путь передачи ВИЧ, генетические особенности (наличие или отсутствие CCR5 рецепторов) и может быть выше или ниже.

Иммунная система большинства людей успешно контролирует ВИЧ, не требуя лечения на протяжении многих лет.

Показатель числа CD4+ клеток – это анализ крови, который определяет, насколько хорошо функционирует иммунная система у людей с вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ). CD4+ клетки - это разновидность лейкоцитов. Лейкоциты играют важную роль в борьбе против инфекций. CD4+ клетки также называют Т-лимфоцитами, Т-клетками, или Т-хелперами.

ВИЧ поражает CD4+ клетки. Число CD4+ клеток помогает определить, могут ли возникнуть другие инфекции (оппортунистические инфекции). Тенденция изменения показателя числа CD4+ клеток более важна, чем значение отдельно взятого тестирования, поскольку его данные могут меняться изо дня в день. Тенденция изменения показателя числа CD4+ клеток во времени демонстрирует влияние вируса на иммунную систему. У ВИЧ-инфицированных, не получающих лечения, показатель числа CD4+ клеток обычно снижается с развитием ВИЧ. Низкий показатель числа CD4+ клеток зачастую указывает на ослабленную иммунную систему и более высокие шансы развития оппортунистических инфекций.

Зачем проводится тестирование

Измерение показателя числа CD4+ клеток проводится с целью:

Наблюдения за тем, как ВИЧ-инфекция поражает вашу иммунную систему.

Помочь вовремя поставить диагноз синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД). ВИЧ приводит к СПИДу – длительному хроническому заболеванию, от которого невозможно излечиться.

Определения, когда лучше начать антиретровирусную терапию, которая снизит скорость развития ВИЧ-инфекции в организме. За более подробной информацией обращайтесь к пункту «Результаты».

Определения риска развития у вас других инфекций (оппортунистических инфекций).

Определения, когда лучше начинать профилактическое лечение оппортунистических инфекций, например, прием медикаментов для предотвращения пневмоцистной пневмонии (ПЦП).

Показатель числа CD4+ клеток, определенный в момент диагностирования у вас ВИЧ, служит линией отсчета, с которой будут сравниваться все последующие показатели числа CD4+ клеток. Ваш показатель числа CD4+ клеток будет измеряться каждые 3-6 месяцев, в зависимости от состояния вашего здоровья, предыдущего показателя числа CD4+ клеток и от того факта, принимаете ли вы высокоактивную антиретровирусную терапию (ВААРТ).

Как подготовиться к тесту

Прежде чем проходить этот тест, обратитесь к специалисту, который проконсультирует вас относительно значения результатов теста. Узнайте, как связан этот тест с вашей ВИЧ-инфекцией.

Как проводится тест

Медицинский работник, проводящий забор крови, будет выполнять следующие действия:

Наложит эластическую повязку вокруг вашей руки выше локтя, чтобы остановить приток крови. Это увеличивает вены, которые находятся ниже уровня повязки, что облегчает попадание иглы в вену.

Протрет иголку спиртом.

Введет иголку в вену. Может понадобиться больше одной попытки.

Прикрепит к иголке трубку для забора крови.

Когда соберется необходимое количество крови, снимет повязку с вашей руки.

Наложит марлевый компресс или ватный тампон на место прокола кожи иглой, после того, как вынет ее.

Сначала прижмет место прокола, а потом наложит повязку.

Какими будут ощущения

Вы можете ничего не почувствовать во время укола, а можете ощутить незначительную боль в момент прохождения иголки сквозь кожу. Некоторые люди испытывают жгучую боль, пока иголка находится в вене. Тем не менее, большинство людей не испытывают никаких отрицательных ощущений (или же они минимальны) во время введения иглы в вену. Ваши болезненные ощущения будут зависеть от мастерства медицинского работника, который будет брать пробу крови, а также от состояния ваших вен и вашей чувствительности к боли.

Первым исследованием всегда является подсчет лейкоцитарной формулы (см. главу «Гематологические исследования»). Оцениваются как относительные, так и абсолютные значения количества клеток периферической крови.

Определение основных популяций (Т-клетки, В-клетки, натуральные киллеры) и субпопуляций Т-лимфоцитов (Т-хелперы, Т-ЦТЛ). Для первичного исследования иммунного статуса и выявления выраженных нарушений иммунной системы ВОЗ рекомендовано определение CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, соотношение CD4/CD8. Исследование позволяет определить относительное и абсолютное количество основных популяций лимфоцитов: Т-клетки – CD3, В-клетки – CD19, натуральные киллеры (NK) – CD3- CD16++56+, субпопуляции Т лимфоцитов (Т-хелперы CD3+ CD4+, Т-цитотоксические CD3+ CD8+ и их соотношение).

Метод исследования

Иммунофенотипирование лимфоцитов проводится c использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным ангинам на клетках иммунной системы, методом проточной лазерной цитофлуорометрии на проточных цитофлуориметрах.

Выбор зоны анализа лимфоцитов производится по дополнительному маркеру CD45, который представлен на поверхности всех лейкоцитов.

Условия взятия и хранения образцов

Венозная кровь, взятая из локтевой вены, утром, строго натощак, в вакуумную систему до указанной на пробирке метки. В качестве антикоагулянта используется К2ЭДТА. После взятия пробирку с образцом медленно переворачивают 8-10 раз для перемешивония крови с антикоагулянтом. Хранение и транспортировка строго при 18–23°С в вертикальном положении не более 24 ч.

Невыполнение этих условий приводит к некорректным результатам.

Интерпретация результатов

Т-лимфоциты (CD3+ клетки). Повышенное количество свидетельствует о гиперактивности иммунитета, наблюдается при острых и хронических лимфолейкозах. Увеличение относительного показателя встречается при некоторых вырусных и бактериальных инфекциях в начале заболевания, обострениях хронических заболеваний.

Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета, а именно о недостаточности клеточно-эффекторного звена иммунитета. Выявляется при воспалениях разнообразной этиологии, злокачественных новообразованиях, после травмы, операций, инфаркта, при курении, приеме цитостатиков. Повышение их числа в динамике заболевания – клинически благоприятный признак.

В-лимфоциты (CD19+ клетки) Снижение наблюдается при физиологических и врожденных гипогаммаглобулинемиях и агаммаглобулинемиях, при новообразованиях иммунной системы, лечении иммунодепрессантами, острой вирусной и хронической бактериальной инфекциях, состоянии после удаления селезенки.

NK-лимфоциты с фенотипом CD3-CD16++56+ Натуральные киллеры (NK-клетки) – популяция больших гранулярных лимфоцитов. Они способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными антигенами, опухолевые клетки, а также другие клетки аллогенного и ксеногенного происхождения.

Увеличение количества NK-клеток связано с активацией антитрансплантационного иммунитета, в некоторых случаях отмечается при бронхиальной астме, встречается при вирусных заболеваниях, повышается при злокачественных новообразованиях и лейкозах, в периоде реконвалесценции.

Т-лимфоциты хелперы с фенотипом CD3+CD4+ Увеличение абсолютного и относительного количества наблюдается при аутоиммунных заболеваниях, может быть при аллергических реакциях, некоторых инфекционных заболеваниях. Это увеличение свидетельствует о стимуляции иммунной системы на антиген и служит подтверждением гиперреактивных синдромов.

Снижение абсолютного и относительного количества Т-клеток свидетельствует о гипореактивном синдроме с нарушением регуляторного звена иммунитета, является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции; встречается при хронических заболеваниях (бронхитах, пневмониях и т.д.), солидных опухолях.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD3+ CD8+ Повышение выявляется практически при всех хронических инфекциях, вирусных, бактериальных, протозойных инфекциях. Является характерным для ВИЧ-инфекции. Снижение наблюдается при вирусных гепатитах, герпесе, аутоиммунных заболеваниях.

Соотношение CD4+/CD8+ Исследование соотношения CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) рекомендовано только для мониторинга ВИЧ-инфекции и контроля эффективности АРВ терапии. Позволяет определить абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов, субпопуляций Т-хелперов, ЦТЛ и их соотношение.

Диапазон значений – 1,2–2,6. Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах (синдром Ди-Джоржи, Незелофа, Вискотта-Олдрича), при вирусных и бактериальных инфекциях, хронических процессах, воздействии радиации и токсических химических веществ, множественной миеломе, стрессе, снижается с возрастом, при эндокринных заболеваниях, солидных опухолях. Является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции (менее 0,7).

Увеличение значения более 3 – при аутоиммунных заболеваниях, остром Т-лимфобластном лейкозе, тимоме, хроническом Т-лейкозе.

Изменение соотношения может быть связано с количеством хелперов и ЦТЛ у данного пациента. Например, снижение количества CD4+ Т-клеток при острой пневмонии в начале заболевания ведет к снижению индекса, а ЦТЛ при этом могут не измениться.

Для дополнительного исследования и выявления изменений иммунной системы при патологиях требующих оценки наличия острого или хронического воспалительного процесса и степени его активности, рекомендуется включать подсчет количества активированных Т-лимфоцитов с фенотипом CD3+HLA-DR+ и ТNK–клеток с фенотипом CD3+CD16++56+.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+HLA-DR+ Маркер поздней активации, показатель гиперреактивности иммунитета. По экспрессии данного маркера можно судить о выраженности и силе иммунного ответа. Появляется на Т-лимфоцитах после 3-го дня острого заболевания. При благоприятном течении заболевания снижается до нормы. Увеличение экспрессии на Т-лимфоцитах может быть при многих заболеваниях, связанных с хроническим воспалением. Отмечено его повышение у пациентов с гепатитом С, пневмониями, ВИЧ-инфекцией, солидными опухолями, аутоиммунными заболеваниями.

ТNK-лимфоциты с фенотипом CD3+CD16++CD56+ Т-лимфоциты, несущие на своей поверхности маркеры CD16++ CD 56+. Эти клетки имеют свойства как Т-, так и NK-клеток. Исследование рекомендовано как дополнительный маркер при острых и хронических заболеваниях.

Снижение их в периферической крови может наблюдаться при различных органоспецифических заболеваниях и системных аутоиммунных процессах. Увеличение отмечено при воспалительных заболеваниях разной этиологии, опухолевых процессах.

Исследование ранних и поздних маркеров активации Т-лимфоцитов (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+) дополнительно назначают для оценки изменений ИС при острых и хронических заболеваниях, для диагностики, прогноза, мониторинга течения заболевания и проводимой терапии.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+CD25+, рецeптор к ИЛ2 CD25+ – маркер ранней активации. О функциональном состоянии Т-лимфоцитов (CD3+) свидетельствует количество экспрессирующих рецепторов к ИЛ2 (CD25+). При гиперактивных синдромах количество этих клеток возрастает (острые и хронические лимфолейкозы, тимома, отторжение трансплантата), кроме того, повышение их может свидетельствовать о ранней стадии воспалительного процесса. В периферической крови их можно выявить в первые три дня болезни. Снижение числа этих клеток может наблюдаться при врожденных иммунодефицитах, аутоиммунных процессах, ВИЧ-инфекции, грибковых и бактериальных инфекциях, ионизирующей радиации, старении, отравлении тяжелыми металлами.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD8+CD38+ Присутствие CD38+ на ЦТЛ лимфоцитах отмечено у пациентов с разными заболеваниями. Информативный показатель при ВИЧ-инфекции, ожоговой болезни. Увеличение числа ЦТЛ с фенотипом CD8+CD38+ наблюдается при хронических воспалительных процессах, онкологических и некоторых эндокринных заболеваниях. При проведении терапии показатель снижается.

Субпопуляция натуральных киллеров с фенотипом CD3- CD56+ Молекула CD56 – адгезивная молекула, широко представленная в нервной ткани. Кроме натуральных киллеров, экспрессируется на многих типах клеток, в том число на Т-лимфоцитах.

Увеличение данного показателя свидетельствуют о расширении активности специфического клона клеток киллеров, которые имеют меньшую цитолитическую активность, чем NK-клетки с фенотипом CD3- CD16+. Количество этой популяции возрастает при гематологических опухолях (ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, плазмоклеточная миелома, апластическая крупноклеточная лимфома), хронических заболеваниях, некоторых вырусных инфекциях.

Снижение отмечается при первичных иммунодефицитах, вирусных инфекциях, системных хронических заболеваниях, стрессе, лечении цитостатиками и кортикостероидами.

Рецептор CD95+ – один из рецепторов апоптоза. Апоптоз – сложный биологический процесс, необходимый для удаления из организма поврежденных, старых и инфицированных клеток. Рецептор CD95 экспрессируется на всех клетках иммунной системы. Он играет важную роль в контроле функционирования иммунной системы, так как является одним из рецепторов апоптоза. Его экспрессия на клетках определяет готовность клеток к апоптозу.

Снижение доли CD95+-лимфоцитов в крови пациентов свидетельствует о нарушении эффективности последнего этапа выбраковки дефектных и инфицированных собственных клеток, что может привести к рецидиву заболевания, хронизации патологического процесса, развитию аутоиммунных заболеваний и повышению вероятности опухолевой трансформации (к примеру, рака шейки матки при папилломотозной инфекции). Определение экспрессии CD95 имеет прогностическое значение при миело- и лимфопролифератиных заболеваниях.

Повышение интенсивности апоптоза наблюдается при вирусных заболеваниях, септических состояниях, при употреблении наркотических средств.

Активированные лимфоциты CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95. Тест отражает функциональное состояние Т-лимфоцитов и рекомендован для контроля за течением заболевания и контроля иммунотерапии при воспалительных заболеваниях разной этиологии.